Հայաստանի ատենախոսությունների բաց մատչելիության պահոց = Open Access Repository of the Armenian Electronic Theses and Dissertations (Armenian ETD-OA) = Репозиторий диссертаций Армении открытого доступа

Հակավիրուսային հակամարմինների կազմում ընդհանուր իդիոտիպերի էքսպրեսիան քրոնիկական հեպատիտ C վիրուսային վարակի ժամանակ

Հովսեփյան, Մարինե Ժորայի (2011) Հակավիրուսային հակամարմինների կազմում ընդհանուր իդիոտիպերի էքսպրեսիան քրոնիկական հեպատիտ C վիրուսային վարակի ժամանակ. PhD thesis, ՀՀ ԳԱԱ Հայկենսատեխնոլոգիա ԳԱԿ ՊՈԱԿ.

[img]
Preview
PDF (Abstract)
Available under License Creative Commons Attribution.

Download (477Kb) | Preview

    Abstract

    Հեպատիտ C վիրուսային վարակը ամμողջ աշխարհում առաջացնում է ոչ միայն առողջապահական, այլև սոցիալ-տնտեսական և հոգեμանական լուրջ խնդիրներ: Ըստ առողջապահության համաշխարհային կազմակերպության տվյալների ավելի քան 180 միլիոն մարդ վարակված է հեպատիտ C վիրուսային ¥ՀCՎ) վարակով, որը հինգ անգամ ավելի μարձր ցուցանիշ է ՄԻԱՎ վարակվածների համեմատ [Lauer and Walker 2001]: Յուրաքանչյուր տարի ևս 3-4 միլիոն մարդ վարակվում է ՀCՎ-ով, երկրագնդի մարդկանց 2-3 %-ը հիվանդ է ՀCՎ վարակով, [NIH Consensus Development Conference 2002; Consensus Statement AFEF Conference 2002]: ՀCՎ-ը պատճառ է հանդիսանում սուր հեպատիտների մոտ 20%, քրոնիկ հեպատիտների 40%, լյարդի ցիռոզի 27%, հեպատոցելուլյար կարցինոմայի 25%, լյարդի տրանսպլանտացիայի 30% և տարեկան 8000-10000 մահվան դեպքերի ԱՄՆ-ում [Perz et al. 2006; Global Burden of Hepatitis C Working Group. 2004]: Կանխատեսվում է, որ 2018թ-ին μոլոր դեպքերը կրկնապատկվելու են, սակայն չնայած իրականցվող μազմաթիվ հետազոտական աշխատանքներին, ՀCՎ վարակի կանխարգելման համար վակցինա դեռ գոյություն չունի: Պարզաμանված չեն ՀCՎ-ի էռադիկացիայի, վարակի պաթոգենեզի, պրոտեկտիվ իմուն պատասխանի զարգացման, վակցինոպրոֆիլակտիկայի և շատ այլ խնդիրներ: Սուր ՀCՎ վարակը մոտավորապես 15-30% դեպքերում ինքնալուծման է գնում, քանի որ հակավիրուսային μջջային կամ հումորալ պրոտեկտիվ իմուն պատասխանը հանգեցնում է ՀCՎ-ի ռեպլիկացիայի ճնշման, իսկ մնացած դեպքերում` չնայած օրգանիզմի յուրահատուկ μջջային և հումորալ հակավիրուսային իմուն պատասխանի ձևավորմանը, սուր վարակը անցնում է քրոնիկ վիճակի: Վիրուսի պերսիստենցիան պայմանավորված է նրա մուտացիոն μարձր ընդունակությամμ և քվազիտեսակների ավելանալու ավելի մեծ արագությամμ, քան իմուն համակարգի էֆեկտոր μջիջների պատասխանի զարգացման արագությունն է: Չնայած չեզոքացնող ՀՄ-ների ինտենսիվ սինթեզին և նրանց μարձր կոնցենտրացիային, այդ ՀՄ-ները միայնակ μավարար չեն լինում կանխելու և վերացնելու ՀCՎ վարակը, այսինքն միայն հակա-ՀCՎ հումորալ իմուն պատասխանը արդյունավետ չէ: Քրոնիկ վարակված հիվանդների մոտ առկա չեզոքացնող, պոլիսպեցիֆիկ ՀՄ-ները խաչաձև ռեակտիվ են վիրուսի տարμեր գենոտիպերի նկատմամμ, այսինքն հնարավորություն ունեն միանալու նմանատիպ անտիգենների հետ: Հակա-ՀCՎ տարμեր սպեցիֆիկության ՀՄ-ների կազմում առաջանում է ընդհանուր 1F7 իդիոտիպի (Id) էքսպրեսիա` կապպա և լյամμդա թեթև շղթաների գերակայումով, որը μնորոշ է օլիգոկլոնալ B μջջային պատասխանին [Grant et al. 1996]: viral load. Изучение новых прогностических маркеров хронического вирусного гепатита C (HCV) является актуальной проблемой современной медицины, что связано с широкой распространенностью, ростом инфицирования, высокой хронизацией и большой частотой осложнений заболевания. В 20-30% случаев острая HCV инфекция разрешается самостоятельно, а в остальных случаях, несмотря на формирование протективного специфического клеточного или гуморального иммунного ответа, болезнь переходит в хроническую стадию. Персистенция вируса обусловлена высокой скоростью мутирования и накоплением квазивидов вируса, что многократно превышает темпы индукции специфического антивирусного ответа эффекторных клеток иммунной системы. Появление общих, перекрестно реактивных идиотипов характерно для некоторых аутоиммунных заболеваний и хронических инфекций, таких как ВИЧ, HCV, вирус иммунодефицита обезьян и др. Экспрессия общего идиотипа 1F7 в анти-HCV антителах разной специфичности с преобладанием κ/λ легких цепей иммуноглобулинов характерна для олигоклонального В клеточного иммунного ответа. Такой ограниченный ответ антител – “заморозка” В клеточного репертуара или “идиотипная” доминантность способствует иммунологическому побегу вируса, а также прогрессированию заболевания. Следовательно, изучение уровня экспрессии общего идиотипа 1F7 в составе анти-HCV антител может способствовать разработке новых прогностических методов диагностики, лечения и профилактики хронической HCV инфекции. Были проведены скрининговые исследования у 1865 условно здоровых индивидумов, 258 больных на программном гемодиализе, 77 медработников, 88 больных с хроническим гепатитом С и 42 больных с ВИЧ коинфекцией. Скрининговые исследования для обнаружения общих HCV антител проводились с использованием иммунохроматографических экспресс тест-систем. Качественное и количественное определение РНК HCV проводилось методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией вирусной РНК. Проводились также общепринятые биохимические, гематологические и клинические исследования. Уровень экспрессии 1F7 антивирусных антител, а также экспрессия 1F7 в сывороточных иммуноглобулинов классов G и M определялся методом иммуноферментного анализа. Результаты проведенных исследований показали, что 70% HCV инфицированных больных имеют высокую вирусную нагрузку, что может свидетельствовать о высоком уровне репликации вируса. У 90% обследованных больных обнаружен высокий уровень экспрессии идиотипа 1F7, как в составе анти-HCV core антител, так и сывороточных иммуноглобулинов классов G и M. Уровень экспрессии идиотипа 1F7 в антивирусных антител коррелируется с уровенем экспрессии идиотипа 1F7 в сывороточных иммуноглобулинов классов G и M у больных с хроническим гепатитом C. Уровень экспрессии идиотипа 1F7 в составе анти-HCV core антител и сывороточных иммуноглобулинов классов G и M достоверно повышено у больных с высоким уровенем РНК вируса гепатита C по сравнению с больными с низкой вирусной нагрузкой. У ВИЧ коинфицированных больных уровень экспрессии идиотипа 1F7 в составе анти-HCV core антител коррелируется с экспрессией этого идиотипа в IgM. Уровень экспрессии идиотипа 1F7 у больных с хроническим гепатитом C коррелируется с вирусной нагрузкой и фиброзом печени и обратно коррелируется с активностью сывороточных трансаминаз. Investigation of new prognostic markers of chronic hepatitis C virus (HCV) infection is an actual problem in contemporary medicine, which is connected with its high and increasing prevalence, with high risk of developing a chronic infection, and with high risk of diseases complications. Approximately 20-30% of acute HCV infections resolve spontaneously, while in other cases, when there is no treatment despite the specific antiviral cellular and humoral protective immune response formation, the disease takes a chronic course. The viral persistence is due to its high mutation rate and more speedy increase of quasispecies, which many times exceeds the speed of the response of effector cells of the immune system. Common, cross-reactive idiotypes (Id) are typical for some autoimmune diseases and chronic infections such as human immunodeficiency virus (HIV), HCV, simian immune deficiency virus, etc. Expression of common 1F7 Id with dominance of κ/λ immunoglobulin light chain on different specificities of anti-HCV antibodies is characteristic of oligoclonal B cell response. Such limited antibody response, i.e. B cells repertoire freeze or idiotypic dominance favours immune escape of HCV and progression of the chronic infection. Therefore, investigation of 1F7 Id expression level on anti-HCV antibodies in individuals who spontaneously cleared HCV infection, in individuals chronically infected with HCV and in patients with HIV co-infection could contribute to elaboration of new prognostic methods of diagnostics, treatment and prevention of HCV chronic infection. Screening tests have been performed to 1865 relatively healthy individuals, 258 hemodialysis patients, 77 health care workers, 88 HCV chronically infected individuals, 42 HIV/HCV co-infected patients in our study. For the detection of total anti-HCV antibodies rapid tests have been used based on chromatographic immunoassay. For the detection of HCV RNA and viral load determinations the reverse transcriptase polymerase chain reaction (PCR) method has been used. Determination of 1F7 Id expression level on anti-HCV core antibodies and serum immunoglobulins G and M has been performed by the ELISA method. Routine biochemical, hematological and clinical investigations have been performed, as well. The results of our study suggested that 70% of HCV infected patients have high level of viral load, which shows high rate of viral replication. 1F7 Id expression level was prominent both on anti-HCV core antibodies and serum M, G immunoglobulins in 90% patients. 1F7 Id expression level on anti-HCV antibodies is correlated with 1F7 Id expression level on both M, G classes of immunoglobulins in HCV infected patients. 1F Id 7 expression level is remarkable high both on anti-HCV core antibodies and M, G classes of immunoglobulins in patients with high level of viral RNA load, in contrast to patients with low level of viral load. 1F7 Id expression level on anti-HCV core antibodies is correlated with the expression of the same idiotype on M class of immunoglobulins in HIV co-infected patients. 1F7 Id expression level on anti-HCV antibodies is correlated with the viral load and liver fibrosis and reversely correlated with serum levels of transaminases in the HCV-infected group. High 1F7 Id expression level is associated with the stage of HIV infection, but the correlation has not been detected with the serum levels of transaminases and the degree of liver fibrosis in HIV co-infected patients. The results of this study suggest that the determination of 1F7 Id expression level on anti-HCV antibodies and serum immunoglobulins G and M can be a reliable prognostic marker for the monitoring of effectiveness of the treatment and the progression of HCV infection.

    Item Type: Thesis (PhD)
    Additional Information: Экспрессия общих идиотипов в составе антивирусных антител при вирусной инфекции хронического гепатита C. Expression of common idiotypes on antiviral antibodies in chronic hepatitis C virus infection.
    Uncontrolled Keywords: Овсепян Марине Жораевна, Hovsepyan Marine
    Subjects: Biology
    Divisions: UNSPECIFIED
    Depositing User: NLA Circ. Dpt.
    Date Deposited: 07 Dec 2015 12:48
    Last Modified: 30 Sep 2016 10:36
    URI: http://etd.asj-oa.am/id/eprint/199

    Actions (login required)

    View Item